Presentación de JotDyes: Precisión pura en el etiquetado de membranas

JotDyes se destacan como los primeros tintes de etiquetado de membranas del mundo que abarcan de manera perfecta toda la bicapa lipídica, ofreciendo un nivel de detalle y precisión nunca antes visto en el campo.

Los tintes convencionales a menudo presentan desafíos, requiriendo reconstitución en solventes hidrofóbicos como DMSO o etanol. Estos solventes pueden introducir alteraciones no deseadas en muestras biológicas debido a su falta de biocompatibilidad. Además, algunos tintes tienden a formar nanoagregados durante la dilución, lo que podría llevar a falsos positivos, especialmente en el análisis de pequeñas partículas biológicas como los vesículas extracelulares (EVs).

Sin embargo, JotDyes están diseñados para iluminarse exclusivamente después de ser incrustados en la bicapa lipídica, evitando la agregación gracias a su solubilidad en agua. Esta característica única no solo mejora la biocompatibilidad, sino que también optimiza los flujos de trabajo, garantizando la eliminación de falsos positivos con una eficiencia sin igual.
JotDyes are water soluble. They do not form micelles or dye aggregates in buffer, unlike traditional commercial dyes like PKH-26. This eliminates false positives. In addition, this allows for simple no wash protocols for flow cytometry assays.

JotDyes ofrece una opción superior para una amplia gama de aplicaciones de etiquetado, que abarcan desde EVs hasta células mamíferas.

Vesículas extracelulares

Los JotDyes solubles en agua detectan con precisión vesículas extracelulares de tamaño nano, exosomas y liposomas, libres de artefactos o falsos positivos. Su química patentada evita la autoensamblaje en micelas o nanopartículas. Solubles en tampones acuosos a >2mg/mL, estos tintes altamente emisivos brillan solo al unirse al objetivo. Validados en más de 20 tipos de EVs de líneas celulares como MSC, PC3, HT29, A549, y fluidos corporales como los glóbulos rojos.

Soluble en agua (>2 mg/mL de solubilidad)

Etiquetado estable (>24 h)

Sin intercambio de tintes entre vesículas

Tiempo de incubación corto (~30-60 minutos)

Variedad de colores disponibles

Datos representativos:

Flow cytometry analysis of EVs labelled with JotDye. Dot plot of (a) unstained EVs, (b) EVs labelled with 1 μM JotDye, (c) 1 μM of JotDye only and (e) 1 μM of commercially available PKH26 dye only.

Imaging flow cytometry. PC3 EVs were labeled with 2 µM JotDye and purified using the Amicon 100KDa filter before they were added to A549 cells and incubated. The cells were analyzed on the Imagestream (Amnis) after (a) 2 h, (b) 4 h and (c) 8 h of incubation. The JotDye-labeled exosomes were observed as spots (green). In the absence of EVs, no fluorescence signal was observed in the cells because all the free JotDye, which does not form micelles, were removed from the purification step (d). By contrast, micelles of DiD dye were not purified and thus there was still fluorescence signals being observed from the cells, suggesting the uptake of the DiD micelles which can be mistaken for DiD-labeled EVs instead.

Células mamíferas

La monitorización de la división celular es una parte importante de la investigación en biología celular sobre la regulación inmune, la función celular, la quiescencia, la proliferación y la diferenciación. Los marcadores de división celular por fluorescencia se utilizan frecuentemente en citometría de flujo e imágenes para estudiar las interacciones y destinos de diferentes tipos celulares in vitro e in vivo. Los tintes de membrana de Jotbody pueden utilizarse para seguir la división celular debido a su unión estable y baja citotoxicidad hacia las células mamíferas. Estos tintes también tienen una eficiencia cuántica muy alta, lo que permite el seguimiento de fluorescencia durante largos períodos de tiempo.

Datos representativos:

Membrane labelling
Confocal images of HepG2 cells that were co-stained with Jotbody Membrane Labelling Dye and a commercially available membrane dye, FM 4-64. (a) JotDye channel (Ex405), (b) FM 4-64 channel (Ex488), (c) brightfield channel, (d) merged channel. The co-localization of JotDye and FM4-64 demonstrates the membrane specificity of the JotDye.

Cell division tracking
A549 mammalian tumor cells labeled by Jotbody Cell Division Tracking dye. JotDye-labeled cells (red) have a 3-log fold increase in fluorescence intensity compared to the unstained cells (black) were maintained over 4 passages through serial passaging before analysis on CytoFLEX (Beckman Coulter). Orange: 1st passage, Green: 2nd passage, Blue: 3rd passage. Magenta: 4th passage.

Red blood cell labelling
Flow cytometry analysis of samples that have a mixture of unstained red blood cells (RBC) and RBC stained with JotDye, in the ratio of (a) 0:5, (b) 2:3, (c) 3:2 and (d) 5:0. The JotDye for RBC remains stable in the cell after labelling and does not cross-over into samples that are not intended to be labelled with the dye. (e) Bright field and (f) fluorescent confocal micrograph of RBCs stain with JotDye.

¿Por qué elegir JotDyes?

  1. Brillo fluorogénico: JotDyes presumen de un alto rendimiento cuántico (>25%), con una intensificación de la fluorescencia solo al unirse a su objetivo. Este cambio de fluorescencia, desencadenado por cambios en el entorno circundante, sustenta el distintivo mecanismo de “encendido”.
  2. Paleta de colores diversa: Con una plataforma cromófora versátil, JotDyes ofrecen hasta 4 colores distintos, con esfuerzos continuos para expandir los perfiles de excitación/emisión. Esta diversidad abre nuevas posibilidades de multiplexado en diversas aplicaciones.
  3. Solubilidad en agua: A diferencia de los tintes propensos a la formación de micelas o nanopartículas en tampones acuosos, los JotDyes permanecen altamente solubles en agua. Esta característica garantiza análisis precisos, especialmente en evaluaciones de citometría de flujo de EVs, donde los falsos positivos pueden sesgar los resultados.

Productos destacados:
JotDye-430 Excitation= 355 nm (UV laser), Emission= 403 – 460 nm
JotDye-490 Excitation = 405 nm (violet laser), Emission = 458 – 508 nm
JotDye-600 Excitation = 488 or 561 nm (blue or yellow laser), Emission = 586 – 635 nm
JotDye-800 Excitation = 638 nm (red laser), Emission = 775-818 nm

Abraza la precisión. Abraza la pureza. Abraza JotDyes: ilumina tu investigación con una claridad sin igual.

Etiquetas: Boletín de noticias

Descubre más desde Jotbody

Suscríbete ahora para seguir leyendo y obtener acceso al archivo completo.

Seguir leyendo