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JotDyes – Colorantes para etiquetar membranas de vesículas extracelulares
Los primeros colorantes de etiquetado de membrana del mundo que abarcan toda la bicapa lipídica. Estos tintes inteligentes solo se ‘iluminan’ después de integrarse en la bicapa lipídica. Los JotDyes están disponibles en 4 colores para adaptarse a sus necesidades de investigación (JotDye-430/JotDye-490/JotDye-600/JotDye-800).
Características clave: Soluble en agua, intercalación completa en la membrana, unión estable, sin intercambio de tintes, sin formación de micelas, elimina falsos positivos, flujo de trabajo simple y tiempo de incubación corto.
Datos representativos seleccionados:
Análisis de citometría de flujo de EVs marcados con JotDye. Gráfico de puntos de (a) EVs sin marcar, (b) EVs marcados con 1 μM de JotDye, (c) 1 μM de solo JotDye y (e) 1 μM de solo tinte PKH26 disponible comercialmente.
Captación de EVs marcadas con JotDye en cultivos celulares. Micrografía de fluorescencia de células HEK-293T tratadas con 20 μg de EVs de PC-3 teñidas con JotDye-600 (rojo). Núcleos teñidos con SYTO Far red (azul).
Citometría de flujo de imágenes de células post-incubadas con EVs de PC3 marcadas con JotDye. Los EVs marcados con JotDye aparecieron como puntos verdes. Las células sin EVs no mostraron fluorescencia, ya que el JotDye libre fue eliminado durante la purificación.
El análisis de imagen confocal de EVs teñidos endógenamente obtenidos de células A549 marcadas con JotDye revela JotDye (verde) dentro de los endosomas tardíos (rojos), lo que indica su participación en la producción de EV.
Aspectos destacados
Kit de transfección EVfect (JOT-EV-T1) – Diseñado para facilitar la carga eficiente de ácidos nucleicos en EVs.
EVfect demostró altas eficiencias de carga tanto para ASOs como para ADN plasmídico.
EVfect superó a Exo-fect en eficacia de silenciamiento génico, con Lipofectamina 3000 como control positivo.
Los EVs cargados con ADN utilizando EVfect mostraron una toxicidad significativamente menor en las células en comparación con los reactivos disponibles comercialmente.
Los ratones inyectados con EVs cargados de nanoluciferasa utilizando EVfect mostraron una actividad de luciferasa continua y estable en el sitio del tumor a lo largo del tiempo.
Kit de modificación de superficie EVcraft (JOT-EV-SM1) – Diseñado para la conjugación covalente de cualquier molécula elegida.
Aproximadamente el 99.8% de los EVs fueron exitosamente conjugados con ambos IgGs.
EVcraft permite la exhibición covalente de hasta 700 IgGs en cada vesícula individual.
EVcraft permite la unión específica de α-CD137-EVs a células T que expresan CD137.
La captación selectiva de α-EGFR-EVs habilitada por EVcraft en las células tumorales positivas para EGFR.
